生化培养箱在多管发酵和膜过滤中的应用中应注意的事项

生化培养箱广泛应用于许多领域。 Zui常用的两种方法是多管发酵法和膜过滤法。 下面我们介绍这两个应用程序中的预防措施。
1,培养温度要求大肠菌群中的细菌不仅生活在肠道中,而且在自然环境中也常存在于水和土壤中,但是对于生活在自然环境中的大肠菌群的培养是合适的温度 大约25℃,如果在37℃下培养仍可以生长,但是如果将生化培养箱的培养温度提高到44.5℃,它将不再生长,直接使用粪便中的大肠菌 到约37℃生长,如将生化培养箱的温度升高至44.5℃仍可继续生长。 因此,生化培养箱中高培养温度的方法可用于区分自然环境中的大肠菌和粪便中的大肠菌。 两种方法都基于此原理。 将已接种的样品或装有过滤器的培养基放入生化培养箱中时,生化培养箱中的温度必须达到要求的温度(44.5±0.5℃),然后才能放置。 如果使用恒温水浴,则水面应高于接种物表面,带有滤膜的培养皿应沉到水浴底部。
2.氯化水样品的处理通过氯处理灭菌的水样中含有一定量的残留氯,这会使大肠菌群处于破坏或抑制状态。 采集水样时,应事先在生化培养箱中取样,中间加硫代硫酸钠,对硫代硫酸钠进行脱氯处理,以使被破坏的细菌得以回收和修复,从而避免了计数结果偏低的现象。 甚至是假阴性。 此外,残留氯对通过过滤法培养的细菌具有特别明显的抑制作用,因此在抽滤过程中应在水样中稀释大量无菌水以减少残留氯的残留。
3.样品的保存在使用前,应将用于生化培养箱采样的容器加盖。 用牛皮纸包裹瓶盖和瓶口。 将其置于160℃-170℃的干燥箱中2小时,或用高压蒸汽灭菌。将真菌在121℃下灭菌15分钟。 采样后正确保存水样也很重要。 保存不当会导致样品中的大肠菌在某些条件下死亡或重新生长,从而影响测试结果的准确性。 将水样送入测试室后,应立即进行测试。 如果由于某种原因无法检测到,应将样品放入冰箱(2℃-10℃)中,并在2小时内进行测试。
4.培养基的准备和保存
(1)将多管发酵法中使用的培养液分成各生化培养箱的发酵管后,应尽快将其放入高压蒸汽灭菌器中,并在115°C下灭菌。 20分钟(注意:此温度也应控制良好,不仅可以实现灭菌,还可以防止培养物分解和损失),然后存放在冰箱或黑暗的地方以备将来使用。
⑵。 滤膜法中使用的m-fc介质主要使用购买的产品。 培养基中苯胺蓝的纯度和质量通常会影响菌落的颜色。 因此,无菌包装的培养基在使用前要进行接种。 典型的粪大肠菌群细菌,观察对比菌落的颜色,以鉴定其稳定性。

5.结果统计
⑴。 多管发酵法的结果是根据不同接种量的发酵管中阳性结果的数量从mpn表中找到相应的mpn指数,以计算每升水中粪便大肠菌群的mpn值。 mpn是“最可能的数字”的缩写,指的是最可能的数字。 这是一种根据统计理论估算水中细菌总数和卫生质量的方法。 非常重要,否则会导致较大的偏差。
⑵。 过滤方法的结果是对过滤器上的蓝色或蓝绿色菌落进行计数,以计算每升水中粪便大肠菌的数量。 因此,为了便于计数并减少错误,理想的水样体积为在滤膜上生长的20-60个粪大肠菌落。
生化培养箱中通常使用多管发酵和膜过滤方法。 掌握这些预防措施可以使我们减少使用过程中错误的发生。

发表评论

电子邮件地址不会被公开。 必填项已用*标注