上海鳌珍生化培养箱在多管发酵法与滤膜法应用中的注意事项

上海鳌珍生化培养箱在多管发酵法与滤膜法应用中的注意事项插图

上海鳌珍生化培养箱在多管发酵法与滤膜法应用中的注意事项

生化培育箱普遍运用于多个范畴,其间zui常运用的两种方法是多管发酵法与滤膜法,下面我们引见一下在这两种运用中有哪些留意事项。

1.培育温度的请求 总大肠菌群中的细菌除日子在肠道中外,在自然环境中的水与土壤中也经常存在,但此等在自然环境中日子的大肠菌群培育的zui适合温度为25℃左右,如在37℃培育则仍可生长,但如将生化培育箱培育温度再升高至44.5℃,则不再生长,而直接来自粪便的大肠菌群细菌,习气于37℃左右生长,如将生化培育箱培育温度升高至44.5℃仍可继续生长。因而,可用提生化培育箱高培育温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区别,两种方法也都基于此理。将接种好的样品或装有滤膜的培育基放入生化培育箱时,生化培育箱箱内温度一定要抵达所请求的温度(44.5±0.5℃)时,方可放入。如用恒温水浴箱时,其水面要高于接种物面,放滤膜的培育皿要沉到水浴箱底部。

2.加氯水样的处置 经氯处置消毒过的水样,水中含有一定量的余氯,使大肠菌群处于受损或受抑止状态,在采集水样时应提早在生化培育箱采样瓶中加硫代硫酸钠,硫代硫酸钠可以脱氯,使受损的细菌得以复苏与修复,然后防止呈现计数成果偏低乃至假阴性的现象。此外余氯对滤膜法培育的细菌其抑止效果尤为明显,所以抽滤时应对水样停止很多无菌水稀释,以削减余氯的残留。

3.样品的保管生化培育箱采样用的容器运用前应盖好瓶盖,用牛皮纸将瓶盖和瓶颈处包裹好,置枯燥箱160℃-170℃干热灭菌2h,或用高压蒸汽灭菌器121℃灭菌15min。采样后水样的正确保管也很重要,如保管不当可使样品中的大肠菌群细菌逝世或在一定条件下再生长,这些都将影响检测成果的准确性。检测室接到水样后,应立刻检测,如因故不能检测时,应立刻将样品置于冰箱内(2℃-10℃)并于2小时内检测。

4.培育物质的制备与保管

⑴.多管发酵法所运用的培育液在分装于各生化培育箱发酵管中后,应将发酵管赶快放于高压蒸汽灭菌器中,在115℃灭菌20min(留意:这个温度也应操控好,既抵达灭菌的效果,还要避免培育物质分化丧失),然后贮存于冰箱或暗处备用。
⑵.滤膜法所采用的m-fc培育基多运用外购的废品,培育基中苯胺蓝的纯度和质量常常影响菌落的颜色,因而,无菌包装的成套培育基在运用前,先接种典型粪大肠菌,以调查比照菌落的颜色,来审定其稳定性。

5.成果计算

⑴.多管发酵法的成果是依据不同接种量的发酵管所呈现阳性成果的数目,从mpn表中查得相应的mpn指数,来核算每升水中粪大肠菌群细菌的mpn值。mpn是“most probable number”的缩写,指zui大可能数,它是依据计算学理论,估量水体中的菌群密度和卫生质量的一种方法,所以准确判别不同接种量发酵管的阳性数是十分重要的,否则将招致较大偏向。
⑵.滤膜法的成果是计数滤膜上呈蓝或蓝绿色的菌落,来核算出每升水样中的粪大肠菌群数。所以为便于计数,削减误差,志向的水样体积是一片滤膜上生长20-60个粪大肠菌群菌落。
多管发酵法与滤膜法是生化培育箱在运用中zui常用到的,把握这些留意事项可以让我们在运用中削减过错的发作。

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